Ultrasonik Hücre Kırıcı Kullanarak Hücre Parçalanması Yoluyla Klorofilin Çıkarılması İçin Özel Adımlar

Ultrasonik hücre kırıcı, kavitasyon oluşturmak için ultrasonun sıvı içindeki dağılım etkisini kullanır, böylece sıvıdaki katı parçacıkları veya hücre dokularını kırar.
Biyoloji endüstrisinin gelişimi, numune sıcaklığının ölçülmesi ve kontrol edilmesi, düşük sıcaklıkta soğutma numunelerinin ve tüm makinenin zeka seviyesinin iyileştirilmesi gibi ultrasonik hücre pulverizatörlerinin kullanıldığı deneylere yönelik gereksinimleri artırdı.
Ultrasonik hücre kırıcı kullanarak ultrasonik hücre kırma yoluyla klorofilin çıkarılması için özel adımlar:
1. Su örneğini santrifüjleyin veya filtreleyin ve emme filtresine bir asetat fiber filtre membranı takın. Filtrasyon için niceliksel hacimde su numunesi dökün ve filtrasyon sırasındaki negatif basınç çok yüksek olmamalıdır (yaklaşık 50kPa). Su numunesi alındıktan sonra filtre membranındaki nemi azaltmak için 1-2 dakika boyunca çekmeye devam edin. 1-2 gün boyunca kısa süreli depolama gerekiyorsa, dondurulmak üzere normal bir buzdolabında saklanabilir. Uzun süreli depolama gerekiyorsa (30 gün), düşük sıcaklıktaki (-20 derece) buzdolabında saklanmalıdır.
2. Fitoplankton içeren filtre membranını çıkarın ve buzdolabında düşük sıcaklıkta 6-8 saat boyunca kurutun. Makasla küçük parçalar halinde kesin ve 5 ml veya 10 ml'lik bir santrifüj tüpüne yerleştirin. Parçaları sıvı seviyesinin altına batırmak için 3-4 ml %90 aseton ekleyin. Parçaları ultrasonik bir kaba yerleştirin ve numunenin hücrelerini kırmak için ultrasonik dalgaları kullanın. (Birleşik yöntemler için parçalanma süresi ve sıklığının tanımlanmasını kolaylaştırmak amacıyla farklı zaman ve frekanslardaki deneylerin karşılaştırılması).
3. Hücre parçalanmasına maruz kalan numuneyi ultrason kullanarak bir santrifüj (3000-4000r/dak) kullanarak 10 dakika boyunca santrifüjleyin. Süpernatantı 5 ml veya 10 ml'lik ölçülü bir şişeye dökün. %90 asetonla 5 ml veya 10 ml'ye seyreltin ve iyice çalkalayın.
4. Süpernatantı bir spektrofotometre üzerine yerleştirin ve sırasıyla 750 nm, 663 nm, 645 nm ve 630 nm dalga boylarındaki absorbans değerlerini okumak için 1 cm'lik optik yollu kolorimetrik çanak kullanın. Numunenin absorbansını düzeltmek için boş absorbans ölçümü olarak %90 aseton kullanın.